抗血清的特性鑒定
根據(jù)不同目的制備的抗血清,對(duì)其中所含抗體的濃度,特異性及免 yi 球蛋白種類的要求也不一樣。為了獲得質(zhì)量和數(shù)量上合符要求的抗血清,在收集動(dòng)物血清前必須對(duì)免yi 效果進(jìn)行檢測(cè),對(duì)收獲后的抗血清也必須對(duì)-些參數(shù)進(jìn)行分析,如效價(jià)、親和力及交叉反應(yīng)等。根據(jù)不同的抗原性質(zhì)選用合適的檢測(cè)方法。*常用的為免yi 沉淀,ELISA,放射免yi等。
效價(jià)又稱滴度(titer),是常用于表達(dá)抗血清中特異性抗體相對(duì)含量的-個(gè)半定量指標(biāo),即在給定的條件下,結(jié)合-定量抗原的抗血清的稀釋度??寡褰?jīng)一系列稀釋后(如倍比稀釋)與定量的抗原反應(yīng),以能檢測(cè)抗血清*大稀釋倍數(shù)即為該抗血清的效價(jià)。不同的檢測(cè)方法測(cè)定同一種抗血清的效價(jià),靈敏度不一樣,抗血清的效價(jià)也不一樣,如沉淀反應(yīng)(瓊脂雙擴(kuò)散)與ELISA二者的效價(jià)相差甚大,后者遠(yuǎn)高于前者。放射免yi 分析(RIA)常用于標(biāo)記小分子抗原來(lái)檢測(cè)抗血清的效價(jià)。
親和力(affinity)表示抗血清與相應(yīng)抗原的結(jié)合強(qiáng)度,是描述抗體特異性的重要指標(biāo),
常用親和常數(shù)K表示。親和常數(shù)K與抗原抗體反應(yīng)的平衡常數(shù)有關(guān):
抗體特異性與交叉反應(yīng):抗體是特異的。只與相應(yīng)抗原反應(yīng)。實(shí)際制備的抗體卻常有非特異性反應(yīng),這是因?yàn)榭乖患冊(cè)斐傻摹6嘟M分抗原之間存在共同的抗原決定簇,或者兩個(gè)抗原決定簇結(jié)構(gòu)類似能與同一抗體結(jié)合,均可出現(xiàn)抗體與異源抗原的交叉反應(yīng)。用瓊脂雙擴(kuò)散能簡(jiǎn)便直觀地反映不同抗原與同一抗血清,或不同抗血清與同一抗原的交叉反應(yīng)。